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一文講述關于高效液相色譜的知識點

更新時間:2024-01-25      點擊次數:586
  高效液相色譜法是一種常用的分析方法,用于檢測物質中的組分和含量。它通常用于分析難以用其他方法進行分離和檢測的物質,如蛋白質、糖類、有機化合物等。
 
  高效液相色譜儀(HPLC)是應用高效液相色譜原理,主要用于分析高沸點不易揮發的、受熱不穩定的和分子量大的有機化合物的儀器設備。它由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中做相對運動時,經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式打印出來。HPLC廣泛應用于生命科學、食品科學、藥物研究以及環境研究中。
 
  高效液相色譜法的作用主要包括分離和分析兩個方面。該方法可以用于分離和純化各種物質,如有機化合物、無機化合物、生物大分子等。同時,它也可以用于分析樣品中的各種成分,如含量、分子量、分子式等。高效液相色譜法通常用于有機酸、氨基酸、糖類、脂肪醇、蛋白質、核酸、酶、藥物等物質的分離和分析。
 
  定性分析和定量分析:HPLC能夠有效地進行化合物的定性分析和定量分析。它可以用來確定樣品中各組分的存在與否,并且可以準確測量這些組分的含量。
 
  高效液相色譜法的工作原理是利用物質在固定相和流動相之間的分配平衡來進行分離。該方法先將樣品溶解在流動相中,然后通過泵將流動相引入色譜柱,使樣品隨流動相通過色譜柱。在色譜柱中,樣品分子與固定相分子之間相互作用,發生吸附、解吸附等過程,使得不同的物質在色譜柱中的移動速度不同,從而得到分離。
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